黄芪-莪术配伍调控EMT对结肠癌HT-29细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

摘要

观察并探讨黄芪-莪术（AC）配伍调控上皮-间质转化（EMT）对结肠癌HT-29细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。分别用0、3、6、12 g·kg-1 AC含药血清作用于人结肠癌HT-29细胞株，采用噻唑蓝（MTT）比色法测定细胞存活和生长，5-溴-2-脱氧尿嘧啶（EdU）细胞增殖实验和Transwell实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力，流式细胞术检测细胞凋亡情况；将BALB/c雄性裸鼠建立结肠癌皮下移植瘤模型，分为空白对照组、6 g·kg-1 AC组、12 g·kg-1 AC组，造模后观察记录瘤体的体积与质量，对瘤组织进行HE染色，蛋白免疫印迹（Western blot）检测黄芪-莪术作用后HT-29细胞和裸鼠瘤组织中Bax、caspase-3、cleaved caspase-3相关凋亡蛋白和E-cadherin、MMP9、MMP2、vimentin相关EMT蛋白的表达水平。结果显示，与空白对照组相比，AC作用后的细胞存活率显著降低，且处于增殖期细胞数量明显降低；各给药组的迁移和侵袭细胞数明显下降，细胞凋亡数也明显上升；体内实验中，与空白对照组比，各给药组的瘤体积和瘤体质量均降低，瘤组织呈现出细胞体积缩小，细胞核有固缩现象，表明AC配伍可能改善EMT过程；此外，各给药组的HT-29细胞和肿瘤组织中，Bcl2、E-cadherin蛋白的表达均不同程度上升，Bax、caspase-3、cleaved caspase-3、MMP9、MMP2、vimentin蛋白的表达均不同程度下降。综上，AC配伍能够显著抑制体内外结肠癌HT-29细胞的增殖、侵袭迁移和上皮-间质转化，诱导结肠癌细胞凋亡。