不同佐剂和免疫途径对结核分枝杆菌多表位融合蛋白TP15免疫原性的影响

摘要

目的探讨不同佐剂和免疫途径对结核分枝杆菌多表位融合蛋白TP15免疫原性的影响。方法制备多表位融合蛋白TP15,分别以MF59和h BCG单独或联合作为佐剂,经皮下或肌肉注射BALB/c小鼠,采用间接ELISA法检测小鼠血清抗TP15特异性Ig G、Ig G1和Ig G2a抗体,流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞中多功能CD4^+T细胞含量,夹心ELISA法检测小鼠腹腔巨噬细胞培养上清中细胞因子IL-1β和IL-12的含量。结果多表位融合蛋白TP15免疫小鼠只产生抗TP15特异性Ig G和Ig G1抗体,不产生Ig G2a抗体。MF59和h BCG单独或联合作为TP15抗原佐剂,皮下注射和肌肉注射均能显著提高机体抗TP15特异性Ig G、Ig G1和Ig G2a抗体水平,且复合佐剂MF59+h BCG的免疫效果更佳。MF59和h BCG单独或联合作为TP15抗原佐剂,皮下注射较肌肉注射更有利于产生Ig G2a抗体,其中复合佐剂MF59+h BCG疫苗免疫小鼠产生Ig G2a抗体的效果最佳,且Ig G1/Ig G2a值显著低于肌肉注射。MF59和h BCG单独或联合作为TP15抗原佐剂经皮下免疫小鼠,脾淋巴细胞IL-2^+CD4^+T细胞含量增加,IL-10^+CD4^+T细胞含量减少,腹腔巨噬细胞分泌IL-1β和IL-12水平增强。结论 MF59+h BCG复合佐剂诱导Th1型细胞免疫漂移,且皮下注射免疫效果优于肌肉注射。