结核分枝杆菌多表位蛋白与PstS1融合的原核表达及免疫原性初探

摘要

目的:结核分枝杆菌PstS1蛋白和12个Th线性表位串连多肽(LEP)的编码基因在大肠埃希菌中融合表达.方法:利用在线数据库SYFPEITHI从20个结核分枝杆菌蛋白中筛选12个Th线性表位(15个氨基酸),它们首尾相连为LEP.全基因合成的LEP编码基因连接到pET-28a-PstS1载体,转入大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达.融合蛋白PstS1-LEP经层析纯化和稀释透析复性,ELISA检测肺结核患者和健康者血清中抗PstS1-LEP IgG.结果:构建了pET-28a-PstS1-LEP表达质粒,SDS-PAGE结果显示获得相对分子量约60kDa的包涵体表达产物.PstS1-LEP用于血清学诊断的敏感度和特异度分别为79.9％和89.9％.结论:PstS1-LEP在大肠埃希菌中表达并具有免疫原性,这为进一步评价PstS1-LEP作为疫苗的候选抗原奠定基础.