猪流行性腹泻病毒纤突蛋白S1主要抗原表位区的原核表达及其抗血清中和活性的鉴定

摘要

本研究运用利用生物信息学软件预测了猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea virus,PEDV)S1蛋白的1个B细胞中和线性表位.为了验证S1蛋白中该中和线性表位的存在,并鉴定其中和活性,本研究构建了含有该B细胞线性表位截短S1基因的重组质粒pGEX-4T-S1,通过蛋白电泳和Westernblotting确定该重组质粒可以在原核细胞表达,将该重组蛋白纯化,免疫BALB/c小鼠,三次免疫后,眼眶静脉采血进行间接免疫荧光及中和试验.蛋白电泳、Westem blotting和间接免疫荧光试验结果表明,截短S1蛋白能够在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达,并能够引起机体的体液免疫反应;中和试验结果表明,该免疫血清能有效中和PEDV,中和效价为1∶64.该研究结果对猪流行性腹泻病毒免疫机制和新型疫苗的研究具有重要的借鉴意义.