一株用于研究环境因素暴露效应的神经样细胞

摘要

为建立一株可用于研究长期环境因素暴露的永生化神经样细胞,使用b FGF作为预诱导剂,BHA、DMSO和β-巯基乙醇作为诱导剂,诱导人脐带间充质干细胞向神经样细胞分化,观察细胞形态变化,并通过细胞免疫荧光和RTPCR检测Nestin、NSE、GFAP和MAP2的表达,判断是否具有神经样细胞特异性.将诱导成功的细胞连续传代,利用稀释法分离出单细胞克隆.筛选出可以连续传代50次以上的细胞,RT-PCR检测Nestin和MAP2基因表达差异,判断所获得的单克隆细胞的神经样特性是否能够维持.结果显示,诱导后的细胞胞体凸起,免疫荧光检测Nestin、NSE、GFAP蛋白表达均阳性,说明成功将MSCs诱导为神经样细胞,Nestin基因表达在传代11次时升高1.32倍,在50次时降低8.85倍,而MAP2基因表达在传代11次时升高2.12倍,在50次时升高7.29倍,说明其已经由神经干细胞分化为神经样细胞.本研究得到的神经样细胞单克隆可以连续传代,并且保持神经样细胞特性,可以作为检测环境因素对神经系统慢性损伤作用研究的细胞模型.