干扰IGF2BP2下调MYC表达抑制结直肠癌细胞增殖、迁移并促进肿瘤免疫

摘要

目的探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)对结直肠癌细胞增殖、迁移能力和肿瘤免疫微环境的影响及其可能的分子机制.方法使用癌症基因图谱(TCGA)数据库分析结直肠癌及癌旁组织的IGF2BP2和MYC表达水平.采用RNA干扰技术(RNAi)沉默HCT-116和SW480人结直肠癌细胞的IGF2BP2表达,实时定量PCR检测沉默效果.敲低IGF2BP2后,集落形成实验、CCK-8实验、5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)实验检测细胞集落形成和增殖能力,Transwell^(TM)实验检测细胞迁移能力,实时定量PCR检测IGF2BP2、MYC、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素10(IL-10)的mRNA表达.Western blot法测定IGF2BP2、MYC的蛋白表达,RNA免疫共沉淀后实时定量PCR(RIP-qPCR)检测HCT-116细胞中IGF2BP2与MYC mRNA结合能力.结果TCGA数据库结果表明,IGF2BP2和MYC在结直肠癌组织中的表达显著高于癌旁组织,且IGF2BP2高表达的结直肠癌患者生存期更短.沉默IGF2BP2后,HCT-116和SW480细胞的活力、增殖、迁移能力降低.IGF2BP2敲低组MYC、TGF-β、IL-10的mRNA表达显著降低,而TNF-αmRNA表达升高;MYC蛋白表达及mRNA稳定性均显著下降.RIP-qPCR结果表明IGF2BP2能够与MYC mRNA结合.结论干扰IGF2BP2下调MYC表达抑制结直肠癌细胞增殖、迁移并促进肿瘤免疫.