ox-LDL/β2GPI/aβ2GPI复合物促进小鼠RAW264.7细胞凋亡和炎症因子表达

摘要

目的 探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(ox-LDL/β2GPI/aβ2GPI)复合物对小鼠RAW264.7细胞凋亡和炎症因子表达的影响及机制。方法 分别用培养基、ox-LDL、β2GPI/抗β2GPI抗体复合物、ox-LDL/β2GPI复合物、ox-LDL/抗β2GPI抗体复合物和ox-LDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物处理细胞。用TAK-242阻断Toll样受体4(TLR4)、雷帕霉素(rapamycin)阻断哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)探究相关通路的作用。最后,用不同浓度的TNF-α刺激细胞。用凋亡试剂盒检测细胞的凋亡,实时定量PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的mRNA表达,Western blot法检测TNF-α、IL-1β、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)的蛋白水平。结果 ox-LDL/β2GPI/aβ2GPI复合物能够诱导细胞凋亡、Bcl2表达降低、c-caspase-3表达增加,还可促进TNF-α和IL-1β表达,通路抑制剂可部分减轻凋亡水平和炎症因子表达;一定浓度的TNF-α可促进细胞凋亡。结论 ox-LDL/β2GPI/aβ2GPI复合物通过TLR4、mTOR通路诱导RAW264.7细胞表达炎症因子,促进细胞凋亡。