新型Bcr／Abl和Src双靶点抑制剂FB2治疗伊马替尼耐药的慢性髓系白血病的作用及机理研究

摘要

目的：Bcr／Abl酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼（imatinib）可有效治疗Ph染色体阳性的慢性髓系白血病（chronic myelogenous leukemia，CML），但许多进展期病人逐渐出现imatinib耐药。FB2属嚷唑嘧啶胺化合物，是一种新型Bcr／kbl和Src双靶点抑制剂，本研究旨在探讨gk#bFB2对人慢性髓系白血病细胞K562的imatinib不同耐约倍数细胞的作用，并观察FB2对野生型及具有突变位点的Bcr／Abl激酶Ⅸ活性的影响。方法：建立K562的imatinib不同耐药倍数的细胞株K562R，观察FB2在体外对K562R细胞增殖的抑制作用；westernbJot分析方法检测FB2对K562R细胞的Bcr／Abl、c—Src和Lyn的蛋白表达及其磷酸化水平的影响；纯化野生型及具有位点突变的蛋白激酶区域，观察FB2对Abl激酶区的影响。结果：FB2在体外对不同耐药倍数K562R细胞增殖具有一定的抑制作用。作用机理研究表咧，FB2明显降低Bcr／Abl、c-Sre和Lyn的磷酸化水平；FB2可抑制野生型及Y253F位点突变的Bcr／Abl激酶区活性，但对T315I位点突变的激酶区活性无明显影响，与阳性对照药dasatinib相当。结论：FB2可明显抑制imatinib耐药的K562细胞的增殖，其抗慢性髓系白血病的作用与抑制Bcr／Abl、Src的磷酸化水平直接相关，提示FB2有望成为一种新型克服imatinib耐药的治疗慢性髓系白血病的双靶点药物。