活血解毒中药配伍对缺氧/复氧诱导H9C2心肌细胞自噬损伤的保护机制

摘要

目的 探究活血解毒中药配伍对缺氧/复氧诱导H9C2心肌细胞自噬损伤的保护作用及其机制.方法 采用H9 C2心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,筛选有效给药浓度,采用C C K8法检测细胞活性;流式细胞术检测心肌细胞凋亡率;激光共聚焦显微镜观察自噬标志物LC3的表达;实时荧光定量PCR检测Beclin-1、LC3和Bcl-2 mRNA含量;Western blot法检测Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、Cleaved caspase-3、β-catenin、p-p65、Bcl-2、p62、p-AKT、p-mTOR等蛋白的表达.结果 活血解毒中药能增强心肌细胞生长活性,降低其凋亡率和自噬水平;增强PI3K/Akt/mTORC1通路的活化;减少Bec-lin-1和LC3 mRNA含量,升高Bcl-2 mRNA含量;减少Bec-lin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、Cleaved caspase-3、β-catenin、p-p65等蛋白的表达,增加p62、p-AKT、p-mTOR和Bcl-2等蛋白的表达量.结论 活血解毒中药可通过促进PI3K/Akt/mTORC1信号通路活化增强,抑制心肌细胞过度自噬和凋亡水平,从而对缺氧/复氧诱导的H9 C2心肌细胞损伤起到保护作用.