NR2A反义寡核苷酸对短暂性脑缺血/再灌注大鼠海马神经元损伤的保护作用

摘要

探讨NMDA受体亚单位2A(NR2A)反义寡核苷酸在短暂性脑缺血/再灌注大鼠海马神经元损伤中的保护作用,为研制和开发针对NR2A的特异性新药提供理论基础和形态学依据.方法　健康♂SD大鼠随机分为正常对照组、假手术对照组和缺血/再灌注组.经生理盐水、错义寡核苷酸和反义寡核苷酸预处理后,以四血管阻断法建立短暂性全脑缺血(15 min)/再灌注(1、2、3和5 d)动物模型.在确定的时间点进行灌注固定、取材、石蜡包埋和组织切片(片厚8 μm),然后行TUNEL反应、焦油紫染色、原位杂交染色以及免疫组织化学染色.结果　短暂性脑缺血/再灌注(I/R)3 d,大鼠海马CA1区出现大量的凋亡阳性细胞;I/R 5 d大鼠海马CA1区细胞严重受损,与对照组相比二组差异具有显著性(P<0.05).经NR2A反义寡核苷酸预处理后,I/R 3 d和I/R 5 d海马CA1区的细胞凋亡和细胞损伤明显减轻,与对照组相比二组差异具有显著性(P<0.05).NR2A反义寡核苷酸能抑制I/R 1 d NR2A mRNA表达和I/R 2 d蛋白质表达,与对照组相比差异具有显著性(P<0.05).结论　短暂性全脑缺血后,NR2A反义寡核苷酸能明显地减轻缺血诱导的大鼠海马CA1区细胞凋亡和细胞损伤,且这种作用与NR2A反义寡核苷酸特异性抑制NR2A及其mRNA的表达密切相关.