体外诱导成熟骨髓来源的树突状细胞对T细胞增殖的影响

摘要

目的研究体外诱导成熟的小鼠骨髓来源的树突状细胞对T细胞增殖的影响，为进一步研究树突状细胞的功能及临床肿瘤治疗的应用提供技术方法。方法应用IL-4、GM-CSF培养小鼠骨髓细胞5—7天，加入黑色素瘤(B16)冻融抗原继续培养1-2天，流式细胞仪检测细胞表面分子CD83、CD86，并与同种异体T细胞混合培养72小时，终止培养前16小时加入3H-TdR(0.5μGi／孔)，γ-液体闪烁仪测定cpm值。结果抗原装载后流式细胞仪检测CD83、CD86表达，IL-4+GM-CSF+TNF-α组(61．68％，71.25％)及IL-4+GM-CSF+冻融抗原组(63．11％，76．88％)明显高于对照组(2．41％，3．88％)及单纯IL-4+GM-CSF培养组(21.86％，28．69％)(P<0．001)，IL-4+GM-CSF+TNF-α组与IL-4+GM-CSF+冻融抗原组比较CD83、CD86表达没有显著性差异；液闪仪检测结果显示，IL-4+GM-CSF+冻融抗原组刺激T细胞增殖的能力明显强于其它组，且有显著性差异(P<0．001，P<0．05)。结论小鼠骨髓细胞体外培养可以成功诱导扩增出足够量树突状细胞，经肿瘤抗原刺激后绝大部分成熟，并能够刺激同种异体T细胞大量增殖，参与免疫应答。