补肾温阳法诱导Foxp3+调节性T细胞在哮喘免疫治疗中的作用

摘要

目的 探讨补肾温阳中药通过诱导转录因子Foxp3活化、调控调节性T细胞,而发挥对变应性哮喘的免疫治疗作用.方法 80只BALB/c(白变种实验室老鼠)小鼠随机分成4组:对照组、哮喘组、中药干预组及中药+抗体干预组,用屋尘螨(HDM)变应原经腹腔注射致敏、滴鼻激发复制变应性哮喘样肺部炎症模型.中药干预组、中药+抗体干预组每只小鼠给予补肾温阳中药(用淫羊藿、巴戟天免煎颗粒配制500 ul灌胃qod,对照组给予500 ul NS.观察各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类及计数结果;检测各组BALF上清细胞因子IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度及血清IgE水平;分离小鼠脾脏细胞,以流式细胞仪方法检测CD4+CD25+Treg细胞;用实时荧光定量PCR检测Foxp3-mRNA.结果 正常对照组、中药干预组BALF中IL-10、IFN-γ、TGF-β 1浓度分别高于哮喘模型组(P＜0.01)和中药+抗体干预组(P＜0.05);中药干预组BALF中IL-10、IFN-γ、TGF-β 1浓度低于正常对照组(P.＜0.05);哮喘模型组BALF上清细胞因子(IL-10、IFN-γ、TGF-β 1)浓度高于中药+抗体干预组(P＜0.05).血清IgE水平正常对照组、中药干预组均分别低于哮喘模型组(均为P＜0.01)及中药+抗体干预组(均为P＜0.05);中药干预组血清IgE水平低于正常对照组(P＜0.05).哮喘模型组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、Foxp3-mRNA表达水平较正常对照组、中药干预组均明显减低,差异有统计学意义(分别为P＜0.01,P＜0.05).与哮喘模型组、中药++体干预组比较,中药干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、Foxp3-mRNA表达水平显著增高,差异有统计学意义(均为P＜0.05).与正常对照组比较,中药干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、Foxp3-mRNA表达水平较低,差异有统计学意义(P＜0.01).与哮喘模型组比较,中药+抗体干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、Foxp3-mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(均为P＜0.05).结论CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3-mRNA、细胞因子(IL-10、IFN-γ、TGF-β 1)均参与了支气管哮喘的发病过程,补肾温阳中药可通过上调CD4+CD25+调节性T细胞数量、诱导Foxp3-mRNA的表达与活化、降低血清IgE水平及增加IL-10、IFN-γ、TGF-β1含量等机制来达到减轻哮喘炎症的作用.