日本血吸虫组织蛋白酶L2基因扩增及克隆

摘要

目的体外扩增日本血吸虫中国大陆株组织蛋白酶L2(SjCL2)的编码区基因序列,将其克隆到真核表达质粒pcDNA3中,为进一步对其进行功能研究奠定基础.方法用TRIZOL分离日本血吸虫成虫RNA,RT-PCR扩增目的基因,将扩增产物定向克隆到真核表达载体pcDNA3中.结果 RT-PCR特异性扩增出SjCL2编码区基因序列,其片段大小为1kb左右,经酶切和PCR鉴定表明所构建的质粒pcDNA-SjCL2中含有所扩增的基因序列.结论 RT-PCR扩增的SjCL2编码区基因序列与预期长度相符合,成功构建了含SjCL2编码区基因的真核表达质粒pcDNA-SjCL2.