汉滩病毒糖蛋白G2酵母双杂交诱饵载体的构建及初步鉴定

摘要

目的利用Ras募集系统(RRS),构建并鉴定含汉滩病毒囊膜糖蛋白G2的诱饵载体.方法将汉滩病毒76-118株囊膜糖蛋白G2基因与Ras基因连接,构建嵌合基因Ras-G2及Ras-G2'(G2'无前导肽序列).将两个嵌合基因分别克隆入酵母表达载体pMet25,并转化至酵母温度敏感株cdc25-2,检测其对RRS系统的激活作用.结果限制性内切酶酶切鉴定表明,Met-G2和Met-G2'载体构建正确.激活试验结果为阴性.结论 Met-G2和Met-G2'载体可用于从cDNA文库中筛选汉滩病毒受体.