不同条件对隐孢子虫卵囊体外脱囊的影响

摘要

目的 分析隐孢子虫在体外不同条件下的脱囊率,以用于隐孢子虫体外培养及免疫学研究.方法 以安氏隐孢子虫卵囊为模型,研究比较卵囊保存方法及时间、卵囊脱囊前处理过程、脱囊温度及时间、脱囊液选择等因素对隐孢子虫卵囊脱囊率的影响.结果 0.5%次氯酸钠处理可提高卵囊脱囊率,但与未处理组相比差异不显著(P＞0.05).0.75%胆酸盐和0.1%胆汁溶液均可以促进卵囊脱囊,与仅仅使用0.25%胰酶或不使用任何脱囊液组相比差异显著(P<0.05).卵囊在酸性条件下(pH =3)脱囊率略高于中性条件(pH =7.2),差异不显著(P＞0.05),但均显著高于碱性条件(pH =9)(P<0.01).卵囊脱囊对温度极敏感,24℃水浴卵囊脱囊率极低,显著低于37℃水浴(P<0.01),且37℃条件下卵囊脱囊率随脱囊时间而升高.结论 温度、酸碱度、脱囊液是影响隐孢子虫卵囊脱囊率的重要因素,采用先将纯化后的卵囊置于0.5%次氯酸钠溶液4℃作用10min,然后在0.75%胆酸盐溶液中37℃孵育3h,可以得到较高的卵囊脱囊率.