哈尔滨一牛源赖氏隐孢子虫分离株的分子鉴定

摘要

目的 对来源于哈尔滨某奶牛场一头3月龄奶牛的一个隐孢子虫分离株进行了分子鉴定.选择隐孢子虫基因分型常用的18SrRNA和actin基因位点,设计引物,用巢氏PCR方法分别扩增出约840 bp和1 066bp目的片段.PCR产物经双向测序后用ClustlX、DNAstar和PHLIP软件进行序列分析.结果 表明在18SrRNA基因位点上,此分离株与报道的牛源C.Ryanae分离株(DQ871345、AY587166、EU410344)同源性最高,达到100%.在actin位点,此分离株和美国牛源C.Ryanae分离株(EU410345)和隐孢子虫鹿样基因型(AY741309)同源性也为100%.种系发育分析显示所获得的分离株在两个基因位点上均和C.Ryanae处于同一进化分支.这些分析表明此次分离获得的隐孢子虫分离株为C.Ryanae.鉴定结果为研究我国牛源隐孢子虫种类分布以及评价其公共卫生意义提供了重要参考.