转化生长因子β1诱导BALB/c 3T3成纤维细胞转化及对早期生长反应基因1表达的影响

摘要

目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)促进BALB/c 3T3成纤维细胞向肌成纤维细胞转化及对早期生长反应基因1(Egr-1)表达的影响.方法 实验组用TGF-β110 ng/ml处理BALB/c3T3成纤维细胞,对照组不给予TGF-β1.采用流式细胞仪检测孵育24、48、72 h的α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞百分比,用免疫细胞化学方法及Western免疫印迹法检测TGF-β1处理15、30、60、90、120、180、240 min的Egr-1表达情况.结果 用TGF-β110 ng/ml培养24 h,实验组和对照组的α-SMA阳性细胞百分率分别为(6.65±0.48)%和(5.53±0.62)%;继续培养至48和72 h,实验组的α-SMA阳性细胞百分率[(28.38±3.60)%和(36.04±0.73)%]显著高于对照组[(9.49±0.21)%和(15.23±0.33)%].免疫细胞化学染色检测Egr-1的结果显示,培养90 min时实验组细胞中出现棕黄色阳性染色颗粒,而对照组阳性染色细胞较少.Western免疫印迹法检测Egr-1的结果显示,实验组培养15 min时的灰度水平(55±26)和对照组(38±18)无明显差别;随着给予TGF-β1时间延长,实验组灰度水平逐渐增加,60和90 min时(115±14和129±22)显著高于对照组,之后实验组灰度水平逐渐降低,在240 min时达最低点(39±7).结论 TGF-β1能诱导BALB/c 3T3成纤维细胞向肌成纤维细胞分化,并且在此过程的早期Egr-1表达增加.