马铃薯体细胞融合及杂交技术的研究

摘要

在原生质体培养再生植株成功的基础上，进行了体细胞杂交技术的研究，比较ＴＰＥＧ化学融合３种方法的融合效率及对细胞的毒害程度，发现在轻微摇动的情况下，于原生质体悬浮滴上逐渐加入ＰＥＧ的方法效果最好。电融合试验结果表明：１．电融合以其高效、无毒害及简便易行等特点优于化学融合；２．应用国产的仅能输出尖波的电融合仪（ＤＲ—１型），利用渡金平行多电极（电极间距０，２ｍｍ，３０个齿为一组交叉排列，总面积为１８×１８ｍｍ２），用１．１ＭＨｚ，１２０—１５７峰－峰电压场强（Ｖｐｐ／ｃｍ）的交变电场处理２５～５０秒，用１．２５～１．５０ＫＶ／ｃｍ的直流高压脉冲电击６３０μｓ左右，对大多数基因型可获得４０％—８０％的融合率和２０％以上的细胞分裂率；３．在电融合液中加入高浓度的Ｃａ２＋对融合有明显抑制作用；４．融合效果与两亲本亲缘关系的远近有关。