降钙素基因相关肽调节滑膜间充质干细胞的增殖与成骨分化

摘要

cqvip:背景:已有研究证实降钙素基因相关肽可促进滑膜间充质干细胞的增殖与成骨分化,但是涉及其具体作用机制的研究较少。目的:观察降钙素基因相关肽干预对滑膜间充质干细胞增殖与成骨分化的影响,同时探讨Wnt/β-catenin信号通路在此过程中的作用。方法:采用胰蛋白酶联合Ⅰ型胶原酶消化法从兔膝关节滑膜组织中分离培养滑膜间充质干细胞。选择第3代滑膜间充质干细胞悬液,分4组培养:空白对照组常规培养,不进行任何干预;实验组加入10-8mol/L的降钙素基因相关肽;抑制剂组加入10-8mol/L的Wnt信号通路抑制剂DKK-1;联合干预组加入10-8mol/L的Wnt信号通路抑制剂DKK-1与10-8 mol/L的降钙素基因相关肽,干预14 d后进行相关指标检测。结果与结论:(1)抑制剂组β-catenin蛋白表达低于空白对照组(P <0.05),实验组β-catenin蛋白表达高于空白对照组(P <0.05),联合干预组β-catenin蛋白表达高于抑制剂组(P <0.05);(2)培养第3-9天,抑制剂组细胞增殖慢于其余3组(P <0.05);培养第5-9天,实验组细胞增殖始终快于空白对照组、联合干预组(P <0.05);(3)实验组碱性磷酸酶活性、矿化结节面积以及骨形态发生蛋白2、Runx2、碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原基因表达高于其余3组(P <0.05),抑制剂组碱性磷酸酶活性、矿化结节面积以及骨形态发生蛋白2、Runx2、碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原基因表达低于空白对照组(P <0.05),联合干预组碱性磷酸酶活性、矿化结节面积以及骨形态发生蛋白2、Runx2、碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原基因表达高于抑制剂组(P <0.05);(4)实验证实降钙素基因相关肽能促进滑膜间充质干细胞的增殖与成骨分化,且Wnt/β-catenin信号通路与其增殖与成骨分化调控密切相关。