人脂肪来源间充质干细胞成骨及成软骨的潜能★

摘要

背景：人脂肪来源间充质干细胞是种具有较强的体外增殖和多系分化能力的成体干细胞,可以从美容吸脂手术中获得,取材方便,原料来源丰富,在生物治疗应用方面蕴藏着巨大的价值.目的：体外分离、培养人脂肪来源间充质干细胞,探讨其基本生物学特性及成骨成软骨的潜能.方法：取美容吸脂获得的脂肪组织,采用Ⅱ型胶原酶消化法分离人脂肪来源间充质干细胞并进行体外培养；观察细胞形态、测定细胞周期、流式细胞仪鉴定细胞表面标志；取第3代细胞,分别加入成骨诱导培养基及成软骨诱导培养基行体外成骨及成软骨诱导.结果与结论：体外培养人脂肪来源间充质干细胞呈纤维样形态,原代细胞24 h 内贴壁,培养5~7 d 后开始形成细胞集落；经细胞周期检测显示 G0/G1,S 和 G2/M 所占比例分别为(88±2)%,(12±2)%和0.03%.经流式细胞仪检测CD29和 CD105呈阳性表达,CD34和 CD45呈阴性表达.RT-PCR 检测显示,人脂肪间充质干细胞经成骨诱导分化后细胞中骨桥蛋白 mRNA 呈阳性表达,经软骨诱导分化后细胞中Ⅱ型胶原 mRNA 呈阳性表达.结果证实,实验成功体外分离、培养人脂肪来源间充质干细胞,其具有向成骨细胞和软骨细胞分化的潜能.%10.3969/j.issn.2095-4344.2012.32.012