小干扰RNA抑制成熟树突细胞表面抗原CD80/CD86的表达

摘要

背景：成熟树突细胞可通过其表面抗原CD80/CD86来启动Th细胞活化，促使Th细胞向Th1细胞分化减少、向Th2细胞方向分化增多。〈br〉 目的：探讨小干扰RNA抑制哮喘小鼠成熟树突细胞表面抗原CD80/CD86表达后对Th1及Th2型细胞因子干扰素γ、白细胞介素4分泌的影响。方法：建立哮喘小鼠模型，分离哮喘小鼠骨髓成熟树突细胞，流式细胞术检测表面标记物 CD11c、CD80、CD86的阳性表达率；设计合成CD80/CD86相关小干扰RNA转染哮喘小鼠成熟树突细胞，荧光定量PCR、流式细胞术检测干扰前后成熟树突细胞中CD80/CD86 mRNA和相应蛋白的表达，将干扰组、未干扰组、转染试剂对照组的成熟树突细胞分别与小鼠T淋巴细胞共培养，ELISA检测上清液中Th1及Th2型细胞因子干扰素γ、白细胞介素4分泌水平。结果与结论：①正常组成熟树突细胞的CD80/CD86的表达与哮喘组相比均明显降低（均P＜0.05）。②小干扰RNA转染哮喘小鼠成熟树突细胞后，干扰组CD80/CD86 mRNA及其蛋白表达水平较其他组均明显降低（均P＜0.05）。③小干扰RNA转染后干扰组共培养体系中干扰素γ水平明显高于其他组（均P＜0.05），白细胞介素4水平则明显低于其他组（均P ＜0.05）。提示哮喘小鼠成熟树突细胞高表达CD80/CD86，小干扰RNA特异性抑制哮喘小鼠成熟树突细胞中CD80/CD86的表达，能增加干扰素γ并减少白细胞介素4的分泌，从而纠正Th1/Th2失衡。