姜黄素抑制大鼠创伤性骨关节炎模型中软骨细胞核因子κB P65核转位的实验研究

摘要

背景：骨关节炎软骨细胞的退化是由于一系列的机械因素、炎性递质、生化因素,尤其是基质金属蛋白酶和活性氧等共同作用导致的。姜黄素在体外已被证明是一种有效地活性氧清除剂和活性氮提供剂,但保护关节软骨抑制骨关节炎作用和机制尚不明确。目的：分析姜黄素防止骨关节炎中软骨损伤的作用机制。方法：SD大鼠30只随机分为假手术组15只和模型组15只。模型组建立大鼠创伤性骨关节炎模型（阳性对照组）,分离软骨细胞进行体外培养,使用姜黄素（姜黄素组）和特异性的核因子κB抑制剂（PDTC组）共培养软骨细胞24 h,Western Blotting和免疫荧光检测核因子κB P65核内外表达情况。RT-q PCR检测细胞Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶13的表达。结果与结论：Western Blotting检测显示阳性对照组P65主要在细胞核中表达,细胞浆中表达较少;姜黄素组P65主要在细胞浆中表达,细胞核中表达较少。免疫荧光观察阳性对照组核因子κB均有不同程度的核转位,核转位细胞的核因子κB P65荧光标记主要浓集于核区;阴性对照组、姜黄素组和PDTC组核转位细胞的核因子κB P65荧光标记主要浓集于胞质区。实时荧光定量RT-q PCR检测显示姜黄素组基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶13的表达显著低于阳性对照组,而Ⅱ型胶原的表达显著高于阳性对照组。结果说明,姜黄素能够通过抑制骨关节炎模型中软骨细胞核因子κB信号通路活化,抑制核因子κB P65核转位,抑制软骨细胞释放基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶13的表达,增加Ⅱ型胶原的含量,保护软骨细胞,延缓软骨退变。