白细胞介素12通过抑制survivin表达加强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导的肝癌细胞凋亡

摘要

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对肝细胞癌(HCC)的治疗作用,以及TRAIL耐药的可能机制和逆转耐药方案. 方法采用原位杂交方法观察HCC与正常肝组织中TRAIL的表达差异.采用不同浓度的sTRAIL(可溶性)处理HCC细胞株及真核表达质粒pIRES-EGFP-sTRAIL转染HCC细胞株,观察sTRAIL的抑癌疗效.建立裸鼠肝癌模型,观察sTRAIL的体内抑癌作用.进一步,检测HCC中survivin的表达并采用反义寡核苷酸封闭治疗.最后,观测sTRAIL和IL-12联合抗癌效果. 结果肝癌组织DR表达量显著强于正常肝组织DR表达量.60例肝癌组织中54例不表达诱捕受体DcR1,25例不表达DcR2,而20例正常肝组织均表达DcR.两种HCC细胞株中DcR1表达缺失.经sTRAIL (100 ng/ml)处理24 h,HCC细胞凋亡发生率约10%,而Jurkat细胞凋亡率达70%以上.体外pIRES-EGFP-sTRAIL转染对肝癌细胞杀伤作用不敏感.体内直接瘤体注射pIRES-EGFP-sTRAIL可对裸鼠肝癌无明显抑制作用.HCC高表达survivin,反义寡核苷酸封闭可部分逆转TRAIL耐药.IL-12使survivin表达明显下调,显著加强TRAIL对HCC细胞的杀伤作用. 结论 HCC对TRAIL诱导的凋亡有耐药现象.survivin参与HCC对TRAIL的耐药机制,反义寡核苷酸封闭可部分逆转TRAIL耐药.IL-12可通过抑制survivin表达增强TRAIL对HCC杀癌作用.联合基因治疗(如TRAIL和IL-12基因)可能成为一种有前途HCC治疗方案.