转存活素基因树突状细胞抗消化道肿瘤的免疫效应

摘要

目的研究转染存活素基因对树突状细胞(DC)免疫功能的影响,观察修饰后的DC在体外诱导的抗消化道肿瘤免疫效应.方法脂质体介导存活素基因转染入DC,用蛋白印迹法检测培养上清存活素的表达,检测转存活素基因DC分泌细胞因子白细胞介素12(IL-12)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的功能,以及经流式细胞仪检测DC表面CD1a、CD83、MHCⅡ、CD80、CD86表达的高低,用噻唑蓝(MTT)法诱导人特异的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的能力.结果培养上清中均可以检测到存活素表达;转存活素基因DC的上清IL-12、TNF-α含量分别为(265.2±32.7) pg/ml和(437.1±83.5) pg/ml,比单纯DC组高(P＜0.05);CD1a、CD83、MHCⅡ、CD80、CD86等在单纯DC表面低表达,在转基因DC表面高表达;MTT法检测,经转染存活素基因的DC提呈的细胞对胃癌细胞、结肠癌细胞、胆管癌细胞杀伤率分别为65%、77%、85%,而单纯DC杀伤作用较低.结论存活素基因转染修饰的DC能诱导细胞毒性T淋巴细胞的特异性,显著地提高DC的抗原提呈功能,体外能诱导高效而特异的抗癌免疫效应.