褪黑素通过抑制JAK2/STAT3通路抑制IL-6诱导的卵巢癌SKOV3细胞上皮间质转化

摘要

目的 探究褪黑素对白细胞介素(IL)-6诱导的卵巢癌SKOV3细胞上皮间质转化(EMT)的作用和机制.方法 首先用不同浓度的褪黑素(1、2、4、6和8 mM)与50 ng/mL重组IL-6蛋白处理SKOV3细胞,CCK-8检测细胞活力,选择两个褪黑素浓度,进行后续实验.然后将SKOV3细胞随机分成四组:对照组(不进行任何处理)、IL-6组(加入50 ng/mL IL-6)、IL-6+褪黑素低剂量组(同时加入50 ng/mL IL-6和2 mM褪黑素)、IL-6+褪黑素高剂量组(同时加入50 ng/mL IL-6和4 mM褪黑素).IL-6加入48 h后,Transwell检测迁移细胞数目,Real-time PCR检测E-cadherin和Vimentin mRNA表达,Western blot检测E-cadherin、Vimentin、Janus激酶2(JAK2)、磷酸化JAK2(p-JAK2)、信号传导和转录激活因子3(STAT3)和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达.结果 褪黑素能够抑制IL-6增加的细胞活力,且呈现剂量依赖性.后续选择2 mM和4 mM褪黑素进行实验.与对照组相比,IL-6组中迁移细胞数目、Vimentin mRNA和蛋白水平、p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3增加,E-cadherin mRNA和蛋白水平降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);与IL-6组相比,IL-6+褪黑素组迁移细胞数目、Vimentin mRNA和蛋白水平、p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3降低,E-cadherin mRNA和蛋白水平增加,且高剂量组中变化更加明显,差异均具有统计学意义(P均<0.05).结论 褪黑素能够抑制IL-6诱导的卵巢癌SKOV3细胞EMT,可能是通过抑制JAK2/STAT3通路发挥作用.