目的:建立一种快速、准确,便于临床推广应用的HLA基因分型方法以用于供体眼球组织的HLA-I、Ⅱ类抗原的基因分型.方法:取新鲜或保存的供体眼球组织(球结膜、眼外肌、视神经、角巩膜缘、巩膜或视网膜)和10mg,快速酚/氯仿法提取DNA,然后用针对HLA-A、B和DRBI亚区的组织特异性引物(sequence special primers,SSP)进行PCR扩增、2%琼脂糖凝胶电泳检测.结果:33只眼球组织均得到了清晰的扩增条带,且同一供体不同眼球组织结界分型一致,整个过程仅需4h.结论:PCR-SSP-HLA基因分型方法简便、准确、快速,重复性好,所需样本量少,是急性尸体器官移植中最为快速可靠的方法,用于高危角膜移植术前供受体间的MHC基因配型,具有重要的临床应用价值.
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