扩增人肝型磷酸果糖激酶基因对唐氏综合征进行定量基因诊断的研究

摘要

目的扩增位于唐氏综合征关键区域的人肝型磷酸果糖激酶基因(PFKL基因),对唐氏综合征进行定量基因诊断.方法采用定量PCR-微孔板杂交检测PCR产物量的方法,对26例唐氏综合征患者及278例正常人外周血DNA标本,扩增PFKL基因,扩增片段长度为185bp;另外,将人肌型磷酸果糖激酶基因(PFKM基因)作为内参照同时扩增,扩增片段长度为365bp,定量PCR产物用微孔板杂交检测.结果 26例患者(包括1例易位型)PFKM与PFKL扩增产物的OD值比值介于0.40～0.60之间,平均值为0.51;正常人扩增产物的OD值比值介于0.80～1.20之间,平均值为1.12,两者比较差异显著(P<0.001).对278例正常人进行同样基因扩增和检测无一例假阳性,所得结果与染色体核型分析结果完全符合.结论定量PCR-微孔板杂交检测PFKL基因拷贝数的方法,简便、快速、特异,可用于唐氏综合征基因诊断.