人类多药耐药mdr1基因启动子的克隆及其转录活性的研究

摘要

目的克隆编码多药耐药基因(mdr1)的启动子片段并探讨其在上皮性卵巢癌中的转录活性.方法 2002年9月至2003年4月华中科技大学同济医学院附属协和医院以人类基因组为模板扩增人类mdr1基因的启动子片断,并将启动子分别插入到pGEM-T载体和荧光素酶报告基因载体中.将重组荧光素酶报告基因系统分别转染紫杉醇耐药(A2780/Taxol)和紫杉醇敏感细胞(A2780),比较启动子在两种细胞中的活性;同时将转染后的A2780/Taxol用曲古霉素A(TSA)处理,观察TSA对启动子转录活性的影响.结果 mdr1启动子在耐药细胞A2780/Taxol中表现出比A2780强的启动子活性,这种活性在TSA诱导后能够提高.结论成功克隆了mdr1启动子片段,在A2780/Taxol细胞中mdr1启动子的功能活性的研究为下一步对多耐药性卵巢癌进行靶向基因治疗提供了重要依据.