辛二酰苯胺异羟肟酸诱导人卵巢癌细胞OC3自噬作用

摘要

目的 探讨辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)是否诱导人卵巢癌细胞OC3发生自噬.方法 SAHA0.05,0.25,1.25,6.25和31.25 μmol· L-1处理OC3细胞24 h后,倒置显微镜吉姆萨和-瑞氏染色观察细胞形态变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活;流式细胞术检测自噬微管相关蛋白轻链3B(LC3B)的表达;AO/EB双染色观察红色酸性自噬囊泡的出现;电镜直接观察自噬囊泡的结构.结果 不同浓度SAHA处理后,OC3细胞形态呈不规则梭形或多角形,细胞空泡化增多,折光性差.MTT结果表明,不同浓度SAHA处理对OC3细胞的存活具有明显的抑制作用,并存在时间和浓度效应关系,浓度相关系数分别为r12h=0.898,r24h=0.976和r48h=0.952(P＜0.05),SAHA 0.05,0.25,1.25,6.25和31.25lμmol·L-1时,时间相关系数分别为0.999,0.654,0.999,0.869和0.922(P＜0.05).SAHA与OC3细胞作用24 h后,AO/EB双染色可见红色酸性自噬囊泡出现;进一步电镜观察,可观察到自噬囊泡结构;流式细胞术检测结果表明,与正常对照组相比,SAHA 0.05,0.25,1.25,6.25和31.25 μmol·L-1处理OC3细胞24 h后,LC3B阳性细胞比率显著升高,分别为(1 9.4±2.4)％,(28.5±3.4)％,(34.6±3.9)％,(38.6±3.2)％和(61.8±1.0)％(P＜0.05).结论 SAHA可能通过诱导人卵巢癌细胞OC3发生自噬而杀伤肿瘤细胞.