LC/ESI-MS测定小鼠血浆中异烟肼及其代谢物

摘要

目的:建立测定小鼠血浆中异烟肼及其代谢物乙酰肼、肼的液相色谱-电喷雾质谱联用(LC/ESI-MS)法.方法:血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,用衍生化试剂3-甲氧基苯甲醛MBA进行柱前衍生化,衍生化产物以甲醇-5 mmol·L-1醋酸铵(pH5.0)缓冲溶液(60:40)为流动相,采用Agilent Zorbax XDB-C8柱(5 μm,4.6 mm×150 mm)分离,通过ESI+-MS以选择离子监测(SIM)模式进行检测,用于定量分析的离子分别为m/z 256.1(异烟肼衍生物),m/z 193.2(乙酰肼衍生物),m/z 151.1(肼衍生物).结果:异烟肼、乙酰肼、肼的线性范围分别为1～64,0.05～3.2,0.025～1.6μg·mL-1;定量下限分别为1,0.05,0.025μg·mL-1;方法的平均回收率分别为98.9%,98.0%,97.2%;平均RSD值分别为2.7%,2.4%,3.1%.结论:本法简便、准确,适用于小鼠血浆中异烟肼、乙酰肼和肼血药浓度的测定.