大鼠胆汁中木犀草素和芹菜素HPLC测定方法的建立及应用

摘要

目的:建立大鼠胆汁中木犀草素和芹菜素浓度测定的HPLC方法,并考察大鼠经口给予菊花提取物(CME)后,木犀草素和芹菜素在胆汁中的排泄情况.方法:胆汁样品经葡萄糖醛酸酶和硫酸酯酶酶解后测定,以SB-C18柱(250 mm ×4.6 mm,5 μm)为分离柱,流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液(52∶48,v/v),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为350 nm.结果:本法木犀草素、芹菜素分离良好,线性范围分别为0.1745～6.986 μg·mL-1(r=0.9998)和0.3693～11.08 μg·mL-1(r=0.9999),绝对回收率为84.6%～106.2%,方法回收率为80.1%～106.9%,日内和日间精密度RSD小于14%.大鼠灌胃给药CME后36 h内,胆汁中木犀草素和芹菜素的累积排泄量占给药量的2.05%和6.34%.结论:本法可以准确、灵敏地同时测定大鼠胆汁中木犀草素和芹菜素的浓度,两者经胆汁排泄证明存在肝肠循环.