扩增片段多态性结合银染法对广西汉族人FⅧ基因内（CA）n的研究

摘要

目的研究广西汉族人群在 FⅧ基因内含子13（CA）n 及内含子22（GT）n（AG）n 两位点的基因频率分布,并用于血友病甲的家系分析。方法采用聚合酶链反应（PCR）扩增 FⅧ基因内含子13（CA）n 及22（GT）n（AG）n 的多态性片段,银染色法显示扩增结果;任选一标本,测其扩增片段长度获得其 i13（CA）n 及 i22（GT）n（AG）n 的具体重复数,从而推算出所有标本两位点的二核苷酸重复数。结果在91名广西汉族人135条 X 染色体中,共检出6种 i13（CA）n 和4种 i22（GT）n（AG）n,i13（cA）n 位点基因频率在 0.0002～0.5408间,多态信息量（polymorphism information content,PIC）为0.5899,实际杂合度为0.6364（28/44）;i22（GT）n（AG）n 位点基因频率为0.0444～0.4963,PIC 为0.5359,实际杂合度为0.5227（23/44）。13个有阳性家族史的血友病家系,用该方法进行家系分析,9个家系可作出诊断,可诊断率为69%。结论 （1）i13（CA）n、i22（GT）n（AG）n 在广西汉族人中 PIC 高,是血友病甲家系分析中的有用位点;（2）相比 FⅧ相关的某些单个限制性片段长度多态性位点（restrictive fragment length polymorphism,RFLP）,i22（GT）n（AG）n 是一个较为有用的位点。