儿童紫癜性肾炎CD4+CD25+调节性T细胞的功能研究

摘要

目的观察紫癜性肾炎（HSPN）患儿CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）及其特异性核转录因子Foxp3以及Th17细胞相关细胞因子IL-17、IL-1β在外周血及肾组织中的表达水平,探讨其在儿童HSPN发病机制中的作用。方法选择2011年3月至2013年3月贵阳儿童医院肾内科收治的HSPN患儿30例为研究对象,患儿均接受肾活组织检查;选择10名同期健康体检儿童为血标本对照组;选择5例在本院行肾积水手术患儿的远离病变部位的正常肾组织为标本对照组。采用流式细胞仪检测外周血单个核细胞（PBMC）中Treg细胞比例、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测PBMC中IL-17、IL-1β和Foxp3 mRNA的表达;免疫组化法检测IL-17、IL-1β在HSPN及对照组肾组织中的表达情况。分析并比较HSPN和对照组中Treg、Foxp3、IL-17、IL-1β的表达变化。结果 HSPN组肾活检30例中病理类型分布为:Ⅰ级0例,Ⅱ级9例,Ⅲ级16例,Ⅳ级5例,Ⅴ级0例。HSPN患儿外周血CD4+CD25+/CD4+T细胞比例及CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T细胞比例分别为（5.84±0.78）%、（1.01±0.46）%,均明显低于健康对照组,差异有统计学意义（t=27.200、33.260,P＜0.05）。HSPN患儿PBMC中IL-17及IL-1βmRNA表达量分别为0.86±0.01、0.71±0.01,均明显高于健康对照组,差异均有统计学意义（t=25.000、31.840,P均＜0.05）;Foxp3 mRNA表达量为0.24±0.02,明显低于正常对照组,差异有统计学意义（t=21.690,P＜0.05）。HSPN患儿肾组织IL-17、IL-1β蛋白表达量为13.31±0.54、11.56±0.28,较对照组明显增强,差异均有统计学意义（t=27.6、14.0,P均＜0.01）。HSPN各病理分型的患儿中IL-17、IL-1β蛋白表达以Ⅳ型最强,其次为Ⅲ型、Ⅱ型,组间比较差异有统计学意义（F=545.800、262.500,P均＜0.05）。结论 Treg细胞、Th17细胞相关细胞因子IL-17、IL-1β参与了儿童HSPN的发病机制;IL-17、IL-1β在肾组织表达增多与肾脏病理损害严重程度相关。