分泌人源性单克隆抗体永生化淋巴细胞系的构建

摘要

目的:构建分泌人源性单克隆抗体(McAb)的永生化B淋巴细胞系.方法:用正丁醇法提取的人卵巢癌细胞系ao10/17抗原在含免疫活化剂的无血清培基中免疫人淋巴细胞;将制备ao 10/17细胞DNA转染经体外免疫的淋巴细胞.采用ELISA筛选和有限稀释法克隆化.结果:建成4株分泌抗卵巢癌McAb的转染体细胞AT1、AT2、AT3和AT4;McAb相加试验表明,它们识别卵巢癌抗原分子的同一表位.AT4已在体外培养460多天,冻存复苏后仍保持抗体产生能力.夹心ELISA发现,人源性McAb AT4能与卵巢癌细胞表面可溶性抗原发生免疫反应.结论:体外免疫和DNA转染的结合,可建成分泌人源性McAb的永生化B淋巴细胞系,为人源性McAb的产生提供了一条技术途径.