早期凋亡的T淋巴细胞诱导生成耐受性树突状细胞的实验研究

摘要

目的:探讨早期凋亡T淋巴细胞的抑制性免疫调节性能.方法:采用定时紫外线照射诱导T淋巴细胞早期凋亡,深低温反复冻融获得坏死T淋巴细胞.体外诱导、纯化并培养骨髓源性不成熟树突状细胞(imDCs), imDCs分别和早期凋亡或坏死T淋巴细胞共培养.用流式细胞仪、双夹心ELISA、[3H]掺入混合淋巴细胞反应等方法分析imDCs吞噬早期凋亡或坏死T淋巴细胞后,在不同处理条件下,MHC-Ⅱ、CD40、CD80、CD86的表达水平、分泌IL-12 p70以及刺激T淋巴细胞增殖能力的差异.结果:imDCs和坏死细胞碎片共培养后明显趋于成熟,其MHCⅡ和CD40、CD80、CD86的表达水平显著上调;分泌较高水平的IL-12 p70;和同种异体处女T淋巴细胞混合培养后显著刺激处女T淋巴细胞增殖. imDCs和早期凋亡的T淋巴细胞共培养后, 其MHC-Ⅱ、CD40、CD80和CD86的表达维持较低水平;仅分泌较低水平IL-12 p70;和同种异体处女T淋巴细胞混合培养后不能刺激淋巴细胞增殖.此外,早期凋亡的T淋巴细胞孵育上清显著抑制了吞噬坏死细胞碎片后的imDCs表达共刺激分子CD40、CD80、CD86.当TGFβ1中和抗体和早期凋亡T淋巴细胞同加入imDCs,在表达MHC-Ⅱ、CD40、CD80、CD86,分泌IL-12 p70,刺激处女T淋巴细胞增殖等方面和吞噬坏死T淋巴细的DCs相比无显著差异.结论:早期凋亡T淋巴细胞通过释放免疫抑制性细胞因子TGFβ1,诱导imDCs呈现出耐受性DCs(TolDCs)的免疫表型及生物学特征,从而发挥抑制性免疫调节作用.