树突状细胞体外高效诱导白血病特异性细胞毒性T淋巴细胞生成

摘要

[目的]研究体外诱导产生的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)及其抗白血病反应。[方法]应用mGM鄄CSF及mIL鄄4细胞因子从小鼠骨髓细胞扩增出成熟树突状细胞(DC),使其负载冻融法制备的白血病细胞相关抗原(TAA),通过观察DC诱导的白血病特异性CTL的免疫表型,MTT分析其对于L7212细胞的抑制率,利用ELISA评价IL鄄2和IL鄄4水平。[结果]骨髓单个核细胞经mGM鄄CSF、mIL鄄4的联合作用7天后光镜及扫描电镜下观察到大量成熟DC生成。经负载TAA的DC活化后T细胞中CD3+、CD8+、CD25+细胞明显增多。FCM显示CD3+、CD8+、CD25+T细胞显著增多,CD8+细胞多于CD4+细胞。活化后T细胞对L7212细胞有特异性杀伤活性,在效靶比为50∶1培养72h后杀伤率达90.1%±2.7%。DC与T细胞共培养上清中IL鄄2的分泌水平为4.656±0.62pg/ml,明显高于普通T细胞培养组的1.436±0.11pg/ml(P=0.011),IL鄄4水平则无明显变化(P>0.05)。[结论]mGM鄄CSF及mIL鄄4配伍诱导生成的DCs经L7212冻融抗原负载后可在体外高效诱导白血病特异性CTL生成。