葡萄糖调节蛋白78上调MMP-2和MMP-9促进鼻咽癌细胞CNE1的增殖与侵袭

摘要

目的 探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对鼻咽癌细胞CNE1的增殖与侵袭的作用机制.方法 收集2018年6月-2019年6月手术切除病灶的56例经病理确诊鼻咽癌患者的肿瘤组织作为鼻咽癌组织的研究对象,男40例,女16例;均为初次确诊鼻咽癌,并且尚未经过放/化疗干预.另同期选取进行治疗的50例慢性鼻咽炎组织作为比对,男38例,女12例.用免疫组化分别检测鼻咽癌组织和慢性鼻咽炎组织中GRP78的表达.CNE1细胞实验分为对照组(CNE1鼻咽癌细胞常规培养,不进行外界干预)、NC组(CNE1鼻咽癌细胞转染LvGFP-Puro-GRP78-NC后,常规培养)、Sh-GRP78组(CNE1鼻咽癌细胞转染LvGFP-Puro-GRP78后,常规培养),转染完成48 h后,可在荧光显微镜下观察到各组细胞内的绿色荧光蛋白(GFP),PCR检测各组细胞中GRP78的mRNA的表达.Brdu标记检测各组细胞的增殖能力,Transwell小室检测各组细胞的侵袭能力,小管形成实验检测各组细胞的血管形成能力;双荧光素酶实验分析GRP78和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9的作用,Western blot检测各组细胞GRP78、MMP-2和MMP-9表达水平.结果 与慢性鼻咽炎组织相比,GRP78在鼻咽癌组织中的表达明显升高,Sh-GRP78组CNE1细胞增殖、侵袭和迁移能力、血管形成能力明显增强,差异均具有统计意义(P＜0.05).双荧光素酶实验结果显示MMP-2和MMP-9是GRP78作用的靶基因.与对照组相比,Sh-GRP78组细胞中GRP78、MMP-2和MMP-9的表达水平明显上升,差异均具有统计意义(P＜0.05).结论 GRP78在鼻咽癌组织中存在高表达的现象,并且GRP78靶向调控MMP-2和MMP-9的表达增强CNE1细胞的增殖、侵袭与血管新生的能力.