共育体系中成骨细胞和破骨细胞生物学特性观察

摘要

目的建立成骨细胞和破骨细胞的体外共育体系,观察在此体系中成骨细胞和破骨细胞生物学特性的变化,探讨成骨细胞和破骨细胞间的相互作用.方法取髂骨松质骨,Ⅱ型胶原酶消化,分次获得成骨细胞和破骨细胞.建立培养上清相通但二者互不接触的成骨细胞-破骨细胞共育模型.以细胞增殖(MTT法)、碱性磷酸酶(ALP)活性代表成骨细胞的成骨活性,以抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性、骨吸收陷窝面积代表破骨细胞的破骨能力,检测共育对成骨细胞和破骨细胞生物学特性的影响.结果成骨细胞呈饱满的梭形,ALP染色阳性;破骨细胞呈多核,TRAP染色阳性,可以吸收骨质形成骨陷窝.当成骨细胞与破骨细胞共育后,其MTT法OD值(0.60±0.08)较单独培养时(0.36±0.03)明显提高(P=0.000);其ALP活性(2337±2 48)u/mg较单独培养时(18.33±0.34)u/mg明显提高(P=0.000).破骨细胞与成骨细胞共育后,形成骨吸收陷窝的平均面积[(6.55±0.34)×10-2]lm2较单独培养时[(5.15±0.17)×10-2]μm2明显增大(P=0.000).结论共育体系中成骨细胞和破骨细胞的功能相互促进,为骨组织代谢的体外研究提供了可靠的模型.