乳腺癌细胞分泌的血管内皮生长因子诱导肺预转移小生境的形成

摘要

目的探讨乳腺癌细胞诱导骨髓来源细胞（BMDCs）肺预转移小生境的形成及其相关机制。方法将乳腺癌4T1细胞接种至雌性小鼠乳腺,建立乳腺癌小鼠实验动物模型。应用共聚焦显微镜观察BMDCs在肺组织中的聚集,应用小鼠细胞因子芯片检测小鼠血清及4T1细胞培养上清中细胞因子的表达水平,应用血管内皮生长因子（VEGF）连续腹腔注射处理小鼠,观察VEGF对肺预转移小生境形成的作用。结果接种4T1细胞第0天,荷瘤组和对照组小鼠肺组织中均无绿色荧光蛋白（GFP）标记的BMDCs聚集。接种4T1细胞后第7、14天,荷瘤组小鼠肺组织中GFP标记的BMDCs数目分别为（8.7±2.2）个/高倍镜视野和（48.8±3.2）个/高倍镜视野,对照组分别为（1.1±0.8）个/高倍镜视野和（3.1±1.7）个/高倍镜视野,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。共聚焦显微镜可见1,1’-双十八烷-3,3,3’,3’-四甲基吲哚羰花青-高氯酸盐标记的乳腺癌细胞多在BMDCs聚集处定植。荷瘤小鼠血清中VEGF、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白介素6水平均高于对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;4T1细胞上清中VEGF水平高于RPMI 1640培养基上清,差异有统计学意义（P＜0.05）。VFGF组和对照组小鼠肺组织中BMDCs数目分别为（22.8±3.6）个/高倍镜视野和（3.1±0.4）个/高倍镜视野,差异有统计学意义（P＜0.05）。VEGF组小鼠肺组织中转移瘤数目为（36.8±5.4）个,对照组小鼠肺组织中转移瘤数目为（12.6±2.2）个,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论原发乳腺癌细胞能够诱导肺预转移小生境形成,这一过程与VEGF密切相关。