腺病毒转导的胞嘧啶脱氨酶基因联合5-氟胞嘧啶对人视网膜色素上皮细胞增殖的抑制作用

摘要

目的研究毒性基因联合前体药物对人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium, HRPE)细胞增殖的抑制作用,探讨防治增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy, PVR)的有效方法. 方法分别将不同浓度胞嘧啶脱氨酶(cytosine deaminase, CD)基因、5-氟胞嘧啶(5-fluorocytosine, 5-FC)加入第3代体外培养的HRPE培养液中,以x-半乳糖甘酶(x-galactosidae, X-gal)与基因乳糖操纵子(lac operon,Lac Z)标记CD基因,通过检测HRPE阳性感染率衡量腺病毒的转导效率.甲基四唑盐比色法(methylthiazolyl-terazollium,MTT)检测细胞的增殖抑制率. 结果 CD基因对HRPE的转染率呈剂量依赖性.CD基因转染阳性的HRPE细胞可将5-FC转变为5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU),有效抑制体外培养的HRPE细胞增殖.本研究中所用的毒性基因联合前体药物治疗系统对RPE细胞生长无明显的旁观效应. 结论腺病毒载体作为高效载体,可选择性将目的基因转入细胞中.为药物防治PVR形成提供了新思路.