金丝桃素对体外培养的人视网膜色素上皮细胞蛋白激酶C活性的影响

摘要

目的研究金丝桃素(hypericin)对体外培养的人视网膜色素上皮(retinal pigment epi-thelium,RPE)细胞的蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)活性的影响. 方法用含0.5～5.0 μmol/L金丝桃素的10%血清培养液培养人RPE细胞,在有或没有PKC激活剂佛波醇-12-豆蔻酰-13乙酸 (phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)预处理RPE细胞的情况下,用PKC检测试剂盒测定金丝桃素对细胞液PKC (cytosolic PKC, c-PKC)和细胞膜PKC(membranous PKC, m-PKC)活性变化的影响. 结果未经PMA处理的人RPE细胞的c-PKC和m-PKC的原始活性分别为(35.34±4.1) pmol*min-1*mg-1和(62.52±8.8) pmol*min-1*mg-1.PMA处理细胞后,c-PKC在5 min内就迅速下降,20 min后下降缓慢,60 min降至处理前的18%,以后一直处于很低的水平.m-PKC在5 min后逐渐升高,至40 min达到高峰以后下降,60 min后恢复至对照水平,10 h后降至对照组的30%以下.用PMA处理RPE细胞48 h后,c-PKC和m-PKC都降低至不能测出.但若将金丝桃素与PMA同时加入后,能抵消大部分PMA对PKC的下降调节. 结论金丝桃素能阻止RPE细胞的PKC转位,使PKC的活性发生变化,有可能促进RPE细胞的凋亡,防止增生性玻璃体视网膜病变的发生.