PCR技术在检测sp3基因表达和ApoE基因型中的应用

摘要

目的应用多聚酶链式反应(PCR)技术检测多发性硬化(MS)和老年性痴呆(AD)的相关基因sp3和ApoE. 方法分离MS患者外周血单个核细胞(PBMC),提取RNA,反转录合成cDNA第1链,PCR扩增sp3基因片段,应用反转录-PCR(RT-PCR)技术在RNA水平上检测sp3基因在MS患者PBMC的表达情况;取AD患者外周血,用低渗溶血法提取白细胞,酚/氯仿法提取DNA,应用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术检测ApoEε基因的多态性. 结果 MS组sp3阴性表达率(45%)明显高于对照组(P<0.01).AD患者的ApoE ε2、ε3、ε4基因频率依次为0.067、 0.700、 0.233,AD患者的ApoE ε4基因频率明显高于正常人. 结论汉族人MS患者存在sp3基因表达缺陷;ApoE ε4与AD密切相关;PCR相关技术可作为基因研究的有力工具.