siRNA沉默HIF-1α基因抑制缺氧诱导的Hela细胞顺铂耐药的研究

摘要

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对Hela细胞顺铂耐药的影响.方法 宫颈癌细胞株分为正常组、实验组、低氧组、低氧阴性对照组.正常氧培养为正常组,低氧培养并转染si-HIF-1α 链为实验组,单纯低氧培养为低氧组,低氧培养并转染siRNA阴性链为低氧阴性对照组;siRNA技术沉默Hela细胞HIF-1α 基因,WB和荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测HIF-1α 蛋白及其mRNA,CCK-8和流式细胞仪检测各组细胞的药物半数抑制浓度(IC50)、生长抑制率和细胞凋亡率.结果 实验组和对照组HIF-1α 蛋白及其表达明显低于低氧阴性对照组和低氧组,差异均具有统计学意义(P<0.05);实验组和对照组的顺铂IC50分别为(5.64±0.61)、(4.76±0.75)μg/ml,明显低于低氧阴性对照组的(6.88±0.86)μg/ml及低氧组(6.84±1.12)μg/ml,差异均具有统计学意义(P<0.05).生长抑制率呈时间梯度增加,72、96 h实验组和对照组的生长抑制率明显高于低氧阴性对照组和低氧组,差异均具有统计学意义(P<0.05).低氧组及低氧阴性对照组顺铂刺激24 h后细胞凋亡率分别为20.7％、23.7％,低于对照组的40.8％ 及实验组的37.6％,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 低氧可诱导Hela细胞顺铂耐药,下调HIF-1α 表达可逆转低氧诱导的Hela细胞顺铂耐药,HIF-1α 与宫颈癌顺铂耐药密切相关.