HIF-1α基因沉默对缺氧诱导晶状体上皮细胞转分化的影响

摘要

目的 缺氧诱导因子1α(HIF-1α)基因沉默对缺氧诱导晶状体上皮细胞(HLECs)转分化的影响.方法 取处于对数生长期的HLEC-B3细胞,随机分为常氧对照组、缺氧对照组、阴性siRNA缺氧组和HIF-1αsiRNA缺氧组.缺氧对照组、阴性siRNA缺氧组和HIF-1αsiRNA缺氧组加入终浓度为100μmol/L的CoCl2溶液中缺氧培养24 h,阴性siRNA缺氧组和HIF-1αsiRNA缺氧组缺氧处理24 h,再分别转染阴性siRNA和HIF-1αsiRNA.转染24 h后,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞HIF-1α及上皮细胞间质转化指标E-cadherin、α-SMA mRNA表达,Western blotting法检测各组细胞HIF-1α、E-cadherin、α-SMA蛋白表达.结果 与常氧对照组比较,缺氧对照组、阴性siRNA缺氧组HIF-1αmRNA及蛋白相对表达量均升高,HIF-1αsiRNA缺氧组HIF-1αmRNA及蛋白相对表达量降低(P均<0.05).与常氧对照组比较,缺氧对照组、阴性siRNA缺氧组E-cadherin mRNA及蛋白相对表达量均降低、α-SMA mRNA及蛋白相对表达量均升高(P均<0.05).与缺氧对照组、阴性siRNA缺氧组比较,HIF-1αsiRNA缺氧组E-cad-herin mRNA及蛋白相对表达量均升高、α-SMA mRNA及蛋白相对表达量均降低(P均<0.05).结论 HIF-1α基因沉默可以抑制缺氧诱导的HLECs发生转分化.