人IL-2信号肽基因增强柯萨奇病毒B3型VP1 DNA疫苗诱导的中和抗体应答

摘要

目的将人白细胞介素2(hIL-2)信号肽基因与柯萨奇病毒B组3型(CVB3) 的VP1基因融合,构建分泌型VP1真核表达质粒pcDNA3/sVP1;免疫小鼠后,通过测定血清特异性中和抗体效价及对致死量CVB3攻击的保护作用,评价疫苗的免疫效果. 方法采用重叠区基因扩增法,将hIL-2信号肽基因连同其下游11个氨基酸残基的基因与CVB3 VP1基因拼接,获得分泌型VP1(sVP1) 的基因;将sVP1基因克隆至真核表达载体pcDNA3,构建分泌型VP1真核表达质粒pcDNA3/sVP1;肌注免疫小鼠,测定血清中CVB3特异性中和抗体的效价;第3次免疫后2周,腹腔内注射1000 TCID50的CVB3,观察小鼠生存情况. 结果成功构建了分泌型VP1真核表达质粒pcDNA3/sVP1,插入的sVP1基因中含有hIL-2信号肽及其下游11个氨基酸残基的基因以及VP1基因;pcDNA3/sVP1可比对照质粒pcDNA3/VP1诱导小鼠产生更高水平的中和抗体. 结论 hIL-2信号肽基因增强了柯萨奇病毒B3型VP1 DNA疫苗诱导的中和抗体应答,为进一步研制高效的CVB3 DNA疫苗提供了实验基础.