SARS病毒N蛋白特异性单链抗体的筛选

摘要

目的利用大容量人源性SARS单链抗体库筛选N蛋白的特异性单链抗体. 方法利用RT-PCR的方法克隆了SARS病毒的N蛋白基因,克隆入原核表达载体pBV220,在大肠杆菌DH5α中进行表达并经离子交换色谱纯化后得到了纯度达95%以上的N蛋白,然后以此蛋白包被25 cm2组织培养瓶,对SARS单链抗体库进行先松弛,后严谨的筛选、富集,进行4轮筛选后对所筛的抗体进行ELISA鉴定. 结果经过4轮的筛选、富集,得到了1株高亲和力的N蛋白单链抗体N18. 结论在对SARS疾病的早期检测或筛查、SARS病毒的生活周期及发病机理的研究中N18将起到重要的作用.