PDCoV猪源噬菌体单链抗体库的构建及抗N蛋白单链抗体的筛选

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摘要

文献综述

1．3PDCoV的诊断技术

1．4PDCoV抗体研究进展

2单链抗体及抗体库研究概述

2．1抗体的结构和功能概述

2．2抗体的基因结构与重排

2．3抗体技术发展概述

2．4单链抗体概述

2．5抗体库技术概述

3噬菌体展示技术概述

3．1噬菌体展示技术原理

3．2噬菌体展示系统分类

3．3噬菌体抗体展示技术

引言

试验一PDCoV猪源噬菌体单链抗体库的构建

1材料与方法

1．1材料

1．2方法

2结果与分析

2．1猪源抗体VH和VL基因的扩增

2．2scFv的SOE-PCR拼接

2．3重组DSEX81-scFv载体的制备

2．4噬菌体抗体库的构建与鉴定

3结论与讨论

试验二抗PDCoV N蛋白噬菌体单链抗体的富集筛选

1材料与方法

1．1材料

1．2方法

2结果与分析

2．1PDCoV N蛋白的原核表达

2．2噬菌体库的富集筛选

2．3噬菌体单链抗体的phage-ELISA鉴定

2．4scFv的序列分析

3结论与讨论

试验三PDCoV N蛋白特异性单链抗体的表达和活性检测

1．1材料

1．2方法

2结果与分析

2．1重组真核表达载体的构建

2．2scFv重组蛋白的表达及纯化

2．3ELISA检测scFv特异性

2．4Western blot检测scFv的结合性

2．5间接免疫荧光试验验证scFv的反应性

3结论与讨论

全文总结

参考文献