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缩略词表（按文中出现的顺序列出）
第一章文献综述
1.1 西马特罗国内外研究概况
1.1.1 西马特罗研究概况
1.1.2 西马特罗的危害
1.1.3 西马特罗残留的检测方法
1.2 噬菌体抗体库的研究进展及应用
1.2.1 噬菌体抗体库的类型
1.2.2 噬菌体抗体库技术的特点与优势
1.2.3 噬菌体抗体库技术的应用
1.2.4 噬菌体抗体库技术的应用前景及存在的问题
第二章鼠源天然单链抗体库的构建
2.1 实验材料
2.1.1噬菌体和菌株
2.1.2 实验动物
2.1.3 主要使用仪器
2.1.4 主要试剂及试剂盒
2.1.5 主要溶液配制
2.2 实验方法
2.2.1 鼠RNA的提取及鉴定
2.2.2 鼠cDNA第一链的合成
2.2.3 引物设计与合成
2.2.4 VH与VL的合成
2.2.5 SOE-PCR拼接ScFv抗体基因及扩增
2.2.6 噬菌体抗体库的构建
2.2.7 抗体库的构建及救援
2.2.8 抗体库滴度的测定
2.3 实验结果
2.3.1 RNA鉴定结果
2.3.2 VH与VL的电泳结果
2.3.3 ScFv扩增的电泳结果
2.3.4 ScFv全长片段及pCANTAB-5E的酶切结果
2.3.5 重组质粒的菌液PCR鉴定结果
2.3.6 重组质粒的酶切鉴定结果
2.3.7 ScFv基因的序列分析
2.3.8 ScFv抗体库的滴度测定结果
2.4 讨论
2.4.1 ScFv基因的拼接
2.4.2 辅助噬菌体的使用
2.4.3 噬菌体的富集方式
2.5 小结
第三章西马特罗完全抗原的制备及鉴定
3.1 实验材料
3.1.1主要使用试剂与仪器
3.1.2 溶液体系
3.2 实验方法
3.2.1 免疫原的制备
3.2.2 包被原的制备
3.2.3 抗原的表征与鉴定
3.3 实验结果
3.3.1 完全抗原的SDS-PAGE鉴定
3.3.2 完全抗原的UV鉴定
3.3.3 完全抗原的MALDI-TOF-MS鉴定及高分辨质谱鉴定
3.4 讨论
3.5 小结
第四章西马特罗单链抗体的筛选及鉴定
4.1 实验材料
4.1.1主要菌株
4.1.2 主要使用试剂及仪器
4.1.3 主要溶液配制
4.2 实验方法
4.2.1 对数生长期大肠杆菌TG1的制备
4.2.2 辅助噬菌体M13K07的制备及滴度测定
4.2.3 噬菌体ScFv抗体库的富集筛选
4.2.4 噬菌体ScFv抗体库的筛选结果的初步鉴定
4.2.5 高亲和力阳性噬菌体克隆的筛选
4.3 实验结果
4.3.1 噬菌体ScFv抗体库的富集筛选
4.3.2 高亲和力阳性噬菌体克隆的分析鉴定
4.4 讨论
4.5 小结
第五章抗西马特罗单链抗体在大肠杆菌中的可溶性表达及性质鉴定
5.1 实验材料
5.1.1 主要菌株及阳性噬菌体单链抗体克隆
5.1.2 主要试剂与仪器
5.1.3 主要溶液配制
5.2 实验方法
5.2.1 对数生长期大肠杆菌HB2151的制备
5.2.2 阳性克隆重组噬菌体的制备
5.2.3 阳性克隆重组噬菌体感染HB2151
5.2.4 13-CIM-ScFv的可溶性表达
5.2.5 可溶性13-CIM-ScFv的SDS-PAGE检测
5.2.6 可溶性13-CIM-ScFv的Western blot检测
5.2.7 可溶性13-CIM-ScFv的竞争抑制ELISA分析方法的初步建立
5.2 实验结果
5.2.1 可溶性13-CIM-ScFv的SDS-PAGE检测结果
5.2.2 可溶性13-CIM-ScFv的Western blot检测结果
5.2.3 可溶性13-CIM-ScFv的效价检测结果
5.2.4 可溶性13-CIM-ScFv的竞争抑制ELISA标准曲线
5.3 讨论
5.3.1 关于ScFv的可溶性表达
5.3.2 关于单链抗体在非法添加剂酶联免疫分析上的应用前景
5.4 小结
全文结论
参考文献
个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果
致谢
郑州大学;
