CpG岛岸甲基化调控人T细胞系中 lag3表达

摘要

目的探讨表观遗传因素DNA甲基化对人T细胞系中淋巴细胞活化基因3（lymphocyte activation gene 3,lag3）表达的影响。方法检测不同T细胞系中lag3的表达水平, 选定lag3表达高低相对的细胞系组成研究系统。分析lag3启动子和转录区的CpG分布以确定潜在表观调控区（CpG岛和CpG岛岸）, 分别测定各T细胞系中相关区段的DNA甲基化水平。用5-杂氮胞苷（5-Aza-2’’-deoxycytidine, 5-Aza-2’’-dc）对细胞系做去甲基化处理, 检测lag3表达水平及DNA甲基化水平的变化。结果 lag3表达水平在J.CaM1.6和CEM细胞中极低, 在Jurkat E6-1细胞中相对较高。不同细胞系中, CpG岛均高度甲基化;CpG岛岸在J.CaM1.6和CEM细胞中高度甲基化, 但在Jurkat E6-1细胞中甲基化水平较低。5-Aza-2’’-dc处理后, J.CaM1.6和CEM细胞中lag3 mRNA和蛋白质的表达均显著上调, 且伴随CpG岛岸去甲基化;而Jurkat E6-1细胞中, 未见CpG岛岸甲基化和lag3表达水平的显著变化。5-Aza-2’’-dc处理不能使CpG岛去甲基化。结论 CpG岛岸的甲基化与去甲基化是lag3转录的表观调控开关。