人胎盘碱性磷酸酶复性效率的影响因素探讨

摘要

目的:研究人胎盘碱性磷酸酶(HPAP)在盐酸胍变性态酶复性过程中加入巯基乙醇对其复性的影响,旨在探讨变性态酶的最适复性条件.方法:应用分光光度法和荧光法进行HPAP的盐酸胍变性及其加入巯基乙醇后变性态酶的复性.结果:在HPAP变性态酶复性过程中加入巯基乙醇,变性中间态酶仍可完全复性:变性态酶的复性率有明显的提高.复性率由27%增加到了68.5%,荧光发射波长由358 nm进而蓝移到347.5nm.结论:巯基乙醇可以提高HPAP胍变性酶的复性效率,从而更深入地阐明了HPAP结构与功能的关系.